树突状细胞（DC细胞）与T细胞之间的相互作用在肿瘤治疗中起着至关重要的作用。有研究表明，骨髓来源的树突状细胞（BMDCs）能够诱导CD103+CD8+组织驻留记忆T细胞亚型的生成，从而增强生殖道局部肿瘤的控制。此外，半乳糖酸的阻断进一步提升了BMDCs诱导抗原特异性CD8+T细胞增殖的能力。全转录组基因表达分析显示，对BMDCs进行仿硅酸处理能够诱导与T细胞活化、粘附和细胞间相互作用相关的基因表现差异。

细胞聚类分析及单细胞亲和性测量表明，糖基化减少的BMDC与CD8+T细胞间的亲和性相互作用更为显著。DC细胞完成抗原呈递后，如何在CD8+T细胞激活及靶细胞杀伤过程中发挥协同作用和调控功能，以及活化CD8+T细胞的记忆功能群体变动与其细胞内的乳酸化、棕榈酸化等代谢过程之间的关系，是当前研究的热点之一。这些研究几乎都需要评估CD8+T细胞的杀伤功能，而本期人生就是博将为大家提供关于DC细胞活化的CD8+T细胞及其杀伤功能评估的解决方案。

实验原理简介

DC细胞是已知的功能最强的抗原呈递细胞（APC），可摄取消化外源抗原并通过MHC分子呈递给CD4+和CD8+T细胞以激发免疫反应。共培养DC细胞与CD8+T细胞是模拟体内CD8+T细胞激活的最佳方法，因此是CD8+T细胞相关研究的重要模型。具体而言，当表达抗原肽-MHCⅠ复合物的DC细胞与CD8+T细胞共培养时，CD8+T细胞通过其表面的T细胞受体（TCR）与DC细胞上的抗原肽-MHCⅠ复合物结合，进而被激活。活化的CD8+T细胞（细胞毒性T细胞）可以通过释放溶解介质（如穿孔素和颗粒酶）实现对靶细胞的杀伤，或通过与靶细胞Fas受体（CD95）结合，触发Caspase-8激活，从而启动靶细胞的凋亡程序。

实验结果展示

人生就是博本实验结果包括：

• （A）流式细胞术检测显示，经过促成熟处理后，C57小鼠骨髓细胞转化为成熟DC细胞，MHCII/CD80/CD40/CD86的表达显著上升。
• （B）利用EasySort™ Mouse CD8+ T Cell Isolation Kit从C57小鼠脾脏分选CD8+T细胞，并通过流式细胞术分析其细胞纯度。
• （C）将灭活的靶细胞（Raw2647）与分选的CD8+T细胞共培养72小时，检测CD8+T细胞的增殖情况。
• （D）共培养后的T细胞和靶细胞（Raw2647）以1:10的比例共育24小时，并通过流式细胞术检测靶细胞中Caspase3酶活性变化，结果显示共培养组（Test）的Caspase3活性显著增加。
• （E）ELISA检测共培养上清中细胞因子的表达，相比Control组，共培养组的IFN-γ、IL-2和TNF-α显著上升。

实验方案及操作流程

体外培养DC细胞及其促成熟处理的具体步骤如下：

1. 从小鼠骨髓中获取细胞，使用分化培养基培养6天后，再以成熟培养基培养24小时以获得成熟的DC细胞。
2. 对Raw2647细胞进行80℃水浴加热灭活处理4小时，然后离心洗涤，使用1640全培养基重悬并计数。
3. 灭活的Raw2647细胞与成熟BMDC以1:1比例共培养24小时，收集细胞后进行低速离心处理。
4. 从C57小鼠脾脏提取细胞，利用EasySort™进行CD8+T细胞分选，并检测纯度。
5. 对分选得到的T细胞进行CFSE染色，培养72小时后观察T细胞的增殖情况。
6. 在24孔板中接种靶细胞（Raw2647 cells），与CD8+T细胞以2:1比例共培养24小时，检测靶细胞的凋亡情况。

更多体外模型处理方案

关于细胞凋亡的诱导剂和模型，人生就是博推荐以下常用诱导剂和研究方案：

• 常用诱导剂：星孢菌素、喜树碱。
• 常用抑制剂：Z-VAD-FMK。
• 细胞凋亡模型可通过星孢菌素、喜树碱或顺铂等药物诱导。

如果需要额外的信息或实验细节，欢迎与我们的技术团队联系，通过人生就是博获取支持！